Identifizierung und Validierung von Inotropie-verbessernden molekularen Targets

Ziel des Projektes ist die Translation, der positiv-inotropen Antwort nach Carbachol-Stimulation, die an explantierten Rattenherzen, von RGS3L-überexprimierenden Tieren beobachte wurde, auf ein Herzinsuffizienzmodell der Ratte. Dazu muss 1.) der Nachweis der Kontraktilitätssteigerung durch Carbachol nach Überexpression von RGS3L in adulten Rattenkardiomyozyten (AP1) und 2.) Die schrittweise die Umsetzung und Validierung der AAV-RGS3L –Applikation und Wirk-samkeit am lebenden Tier erfolgen. Als erster Schritt erfolgt die Überprüfung der lang-fristigen Verträglichkeit und Wirksamkeit der Manipulation am gesunden Tier (AP2). In zweiten Schritt soll dann die RGS3L-Überexpression nach bewährtem Schema erfolgen und die Tiere im bereits beschriebenen Herzinfarktmodell auf die Entwicklung einer infarkt-bedingten Insuffizienz hin charakterisiert werden (AP3, Prophylaktischer Ansatz). Im abschließenden, dritten Projektteil ist die kurative Gabe des AAV-RGS3L geplant (AP4, kurativer Ansatz). Hier muss der richtige Zeitpunkt der AAV-Applikation nach dem Infarkt eruiert werden, der einerseits das Überleben des Tieres sichert und andererseits eine frühzeitige Überexpression von RGS3L erlaubt, dass sich ein protektiver Effekt gegenüber dem Auftreten der Insuffizienz entwickelt. Da über die kardiale Bedeutung von Tiam1, das nach unseren Erkenntnissen in der humanen Herzinsuffizienz hochreguliert ist und einen zentralen Bestandteil des Proteinkomplexes aus RGS3L und p190A-RhoGAP darstellt, wenig bekannt ist, werden zudem Tiam1-knockout-Mäuse eingehend kardial bzgl. Hypertrophie-Entwicklung, Kontraktilitätsveränderungen und Arrhythmie-Neigung charakterisiert werden (AP5).