Bewertung der C5aR1-CXLC4-CXCR3-Achse für Ischämie-induziertes Gefäßwachstum durch AAV-Vektor-vermittelten Gentransfer

Thrombozyten sind primäre Zelle in der Blutstillung und als solche "Wächter" der Gefäßintegrität. Kürzlich haben wir eine hemmende Rolle des Thrombozyten-C5a-Rezeptors C5aR1 in der durch Ischämie induzierten Angiogenese durch Sekretion von CXCL4 beschrieben. Interessanterweise ging eine geringere CXCL4-Konzentration mit einer verbesserten Perizytenzahl im ischämischen Muskelgewebe von Plättchen-spezifischen C5aR1-defizienten Mäusen einher. In einem nächsten Schritt wollen wir nun die Rolle dieser C5aR1-CXCL4-Achse und deren Einfluss auf das Perizyten- und Gefäßwachstum untersuchen. Zu diesem Zweck verwenden wir zwei transgene Mausslinien, die C5ar1floxPf4cre-Maus und die C5ar1-/- Cxcl4-/- Maus im Modell der Hinterlaufischämie. Durch die Einkreuzung eines Cxcr3flox-Stammes in unsere C5ar1-/- Cxcl4-/- Mauslinien, können wir sodann mittels AAV-cre-Vektor diese spezifisch ausschalten. Zusätzlich werden wir einen shRNA-basierten Ansatz zur Reduktion des CSCR3 verwenden. Abschließend wird der Einfluss einer möglichen C5aR1-CXCL4-CXCR3-Achse auf die Revaskularisierung durch eine Mikro-CT-Visualisierung des Gefäßbaums bewertet. Zur erfolgreichen Umsetzung dieses Projektes bringen wir unser Know-how optimal zusammen: Komplementvermitteltes Gefäßwachstum (H. Langer, Lübeck) und virales Vektor-Targeting von Ischämie-induziertem Gefäßwachstum (R. Hinkel, Göttingen). Zusammenfassend hoffen wir den Mechanismus aufzudecken, durch den Thrombozyten C5aR1 das Gefäßwachstum mittels CXLC4 beeinflusst.